SPG膜技術(shù)：艾信條碼與艾信納米粒相結(jié)合，實現(xiàn)高靈敏度多路復(fù)用檢測

發(fā)布：2021-12-23　點擊：1485

基于光學(xué)編碼微球的懸浮陣列技術(shù)在基因分析、蛋白譜分析、早期疾病診斷、治療監(jiān)測等方面的多路檢測受到了廣泛的關(guān)注。但條碼的熒光穩(wěn)定性和檢測靈敏度有待進一步提高，以滿足日益增長的“精準(zhǔn)診斷”需求。

方法:本工作報道了一種基于極穩(wěn)定的AIEgens(AIE33和AIE NIR800)微球作為條形碼，AIEgens1,1,2,3,4,5-六苯基- 1h -silole, HPS)微球作為熒光信號報告器，并結(jié)合流式細(xì)胞儀進行多路檢測的新型懸浮陣列平臺。

結(jié)果:由于HPS納米粒具有良好的熒光信號放大效應(yīng)，與QDs納米粒(提高3倍)和商業(yè)有機染料藻紅蛋白(提高5倍)作為熒光信號報告物的多重檢測方法相比，我們的多重檢測方法具有更高的檢測靈敏度。

結(jié)論:此外，驗證實驗顯示，在患者血清樣本中檢測過敏原的臨床金標(biāo)準(zhǔn)方法與ImmunoCAP相似，該懸浮陣列平臺具有良好的熒光穩(wěn)定性和較強的信號放大能力，具有高靈敏度多路生物檢測的應(yīng)用前景。

關(guān)鍵詞:聚集誘導(dǎo)排放; AIEgens條形碼;AIEgens納米粒;多路檢測過敏原

介紹：

利用光學(xué)編碼微球的懸浮陣列在高通量多路檢測中發(fā)揮了突出的作用，由于其快速結(jié)合動力學(xué)、高通量多路檢測和高檢測靈敏度，是基因分析、蛋白譜分析、早期疾病診斷和治療監(jiān)測的強大工具。熒光編碼微球通常被用作固體載體和跟蹤碼，以實現(xiàn)對多個目標(biāo)的并行檢測，是懸浮陣列中使用的主要技術(shù)之一。熒光編碼微球的理想性能是編碼容量大、均勻性好、熒光穩(wěn)定性高。高檢測靈敏度對于低濃度蛋白或其他生物分子對疾病的早期準(zhǔn)確診斷也非常重要。雖然目前的懸架陣列技術(shù)比傳統(tǒng)的檢測平臺具有更高的檢測靈敏度，但靈敏度還需要進一步提高，以滿足“精準(zhǔn)診斷”日益增長的需求。

結(jié)論

綜上所述，我們首次將AIEgens引入到懸浮陣列中，并成功構(gòu)建了一種基于AIEgens微珠作為條形碼、AIEgens納米粒作為熒光信號報告器、單激光激發(fā)流式細(xì)胞儀進行多路檢測的新型懸浮陣列平臺。我們利用簡易的Shirasu多孔玻璃(SPG)膜乳化方法，通過簡單地改變SPG膜的孔徑，合成了AIEgens條形碼和AIEgens納米粒。制備的微球粒徑分布窄，熒光均勻性好，熒光穩(wěn)定性好。它們的熒光強度也非常穩(wěn)定，即使在高酸性和高堿性的溶液中，證明了在報道的光學(xué)編碼珠中具有優(yōu)越的熒光穩(wěn)定性。我們通過改變AIEgens (HPS, AIE41, AIE33和AIE NIR800)的發(fā)射波長和發(fā)光強度水平，成功地制作了一個包含30個基于“單波長”編碼方法的二維AIEgens條形碼庫。此外，我們將AIE33和AIE NIR800微珠條形碼和HPS微珠熒光信號報告儀結(jié)合在流式細(xì)胞儀上檢測單一樣本中5種常見的過敏原。使用AIEgens納米粒作為熒光信號報告器的多重檢測方法與使用商業(yè)化的藻紅蛋白有機標(biāo)簽(提高5倍)和QDs納米粒(提高3倍)作為報告器的多重檢測方法相比，具有更高的檢測靈敏度。表明HPS納米粒具有良好的熒光信號放大效應(yīng)。通過檢測95例患者樣本獲得的結(jié)果表明，與目前的臨床免疫cap金標(biāo)準(zhǔn)方法相比，每種過敏原在靈敏度和特異性方面都實現(xiàn)了類似的檢測特性。結(jié)果表明，基于具有優(yōu)異熒光穩(wěn)定性的AIEgens微球和具有較強信號放大能力的AIEgens納米球的懸浮陣列平臺具有良好的生物應(yīng)用前景，未來可應(yīng)用于其他蛋白質(zhì)、核酸和細(xì)胞因子。

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